快速蛋白鋅染試劑盒

● 產(chǎn)品組成：                                                        Ver.720359

● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：                                                   

本試劑采用以鋅離子為基礎(chǔ)的負(fù)染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE電泳凝膠染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，實(shí)驗(yàn)方便快速，可以在30 min左右完成，最低能夠檢測(cè)出2 ng的蛋白條帶，該方法不對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生修飾作用，而且經(jīng)過(guò)脫色液處理后，可以用于電洗脫或采用PAGE膠蛋白微量回收試劑盒（貨號(hào)：RTD8108）進(jìn)行膠回收，以便進(jìn)行質(zhì)譜和測(cè)序分析等，也可以用于電轉(zhuǎn)移或用其他染色方法（銀染或考染）對(duì)膠重新染色。

按照每次使用50 ml1×即用型染色液計(jì)算，本產(chǎn)品可以染色 8-10塊mini-PAGE（8×10cm）膠。

● 儲(chǔ)存條件

按照標(biāo)簽溫度貯存，常溫運(yùn)輸。開(kāi)封后一年有效。

● 凝膠染色的操作步驟：

以下步驟以一塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為例。

一. 漂洗：

取出電泳后的 PAGE 凝膠，用超純水漂洗兩次，每次1分鐘。

二. 染色：

2.1 準(zhǔn)備1×即用型染色液：

2.1凝膠染色：

凝膠中加入50 ml 1×即用型染色液，常溫?fù)u床慢搖10分鐘。

注：增強(qiáng)液(100×)在低溫條件下會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，請(qǐng)?jiān)谑褂们?/b>60℃水浴中加熱，震蕩至完全溶解后使用。

三. 漂洗：

棄染色液，用超純水漂洗凝膠兩次，每次1分鐘，至泡沫完全清除干凈。

四. 顯色：

4.1 準(zhǔn)備工作：將顯色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型顯色液。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型顯色液中，搖床慢搖30-60秒。觀察結(jié)果：在黑色背景下，可見(jiàn)光觀察，蛋白條帶為棕褐色，無(wú)蛋白區(qū)域?yàn)轭?lèi)白色；可見(jiàn)光燈箱觀察（凝膠底部打光），蛋白質(zhì)條帶反顯白色，無(wú)蛋白的膠區(qū)則為白色。

五. 漂洗：

棄顯影液，超純水洗滌凝膠2次，每次搖床慢搖1分鐘。

注：凝膠可以在水中保存1-2周。

六. 脫色：

6.1 準(zhǔn)備工作：將脫色液（10×）用超純水稀釋10倍，配成1×即用型脫色液。

6.2 如需要進(jìn)行蛋白切膠回收，將所需的蛋白質(zhì)條帶切下，用超純水漂洗切下的凝膠一次；如凝膠需要考染，銀染或轉(zhuǎn)膜實(shí)驗(yàn)，直接用超純水漂洗整個(gè)凝膠一次。

6.3 棄水，凝膠中加入適量1×即用型脫色液覆蓋凝膠，搖床慢搖5分鐘，倒掉脫色液；

6.4 重復(fù)脫色步驟2次。脫色完全的標(biāo)志是白色凝膠完全脫色為無(wú)色透明。

6.5 超純水漂洗凝膠兩次，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。

●  實(shí)驗(yàn)示例：

             4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝膠顯影后(脫色前)蛋白條帶在黑色背景下為棕褐色
可見(jiàn)光燈箱觀察（凝膠底部打光），蛋白質(zhì)條帶反顯白色