溶菌酶溶液（10mg/ml）

● 產(chǎn)品規(guī)格:

   10 ml

● 產(chǎn)品內(nèi)容:

● 保存條件：

    未配制的溶菌酶干粉和溶解液-20℃保存，有效期24個(gè)月；配制好的溶液-20℃貯存有效期12個(gè)月。

● 產(chǎn)品說(shuō)明:

     Lysozyme，中文名為溶菌酶，EC Number:3.2.1.17，CAS: 12650-88-3，活性>20KU/mg，純化自蛋清(egg white)，不含DNase、RNase和Protease，可以用于以質(zhì)粒抽提、蛋白純化等為目的的細(xì)菌裂解。

● 溶液配制方法：

取10 ml溶解液加到溶菌酶干粉中，徹底溶解，即配成10 ml（10mg/ml）的溶菌酶溶液，-20℃保存。

● 使用方法：

細(xì)菌裂解：

1. 細(xì)菌過(guò)夜培養(yǎng)菌液10 ml 12,000 rpm離心 5 min 后，棄上清，盡量棄除殘余培養(yǎng)基，留取管底部菌體。

2. 加入1 ml細(xì)菌裂解液，50μl 10mg/ml 溶菌酶溶液，用吸頭吹打至無(wú)可見(jiàn)細(xì)胞團(tuán)塊，重懸菌體。

   注：此步驟可加入蛋白酶抑制劑如PMSF，保護(hù)蛋白，抑制降解；如裂解液比較粘稠，可以加入DNaseI溶液，消化基因組DNA。

3. 37℃孵育20 min，期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。

注：溶菌酶的用量和處理時(shí)間與處理的細(xì)菌種類(lèi)密切相關(guān)，用戶(hù)可以根據(jù)細(xì)菌種類(lèi)進(jìn)行調(diào)節(jié)。如革蘭氏陽(yáng)性菌應(yīng)將處理時(shí)間延長(zhǎng)到30-60分鐘。

4. 裂解完成后 13,000rpm4℃離心5 min，將上清（上清中即為可溶性蛋白）轉(zhuǎn)移至新的離心管中，直接進(jìn)行下一步純化或檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。